SALSA® MLPA® Probemix ME029 FMR1-AFF2의
내용 및 프로토콜 변경
새로운 제품별 프로토콜과 함께 향상된 버전의 SALSA MLPA Probemix ME029 FMR1-AFF2를 출시하게 되어 기쁩니다.
제품 내용의 주요 변경 사항:
- FMR1 및 AFF2용 타겟 프로브가 추가되었습니다.
- 소화 컨트롤 프로브 (digestion control probe) 및 상염색체 위치를 감지하는 프로브들이 교체되었습니다.
- 측면 프로브들이 제거되었습니다.
- 여러 참조 프로브들이 교체되었습니다.
ME029 프로토콜의 주요 변경 사항:
- Molecular Pathology (AMP)에서 MRC Holland 부스 (#408)를 방문하십시오.
- 지금까지 ME029에는 Denaturation buffer 바이알 (빨간색 캡)이 함께 제공되었습니다. 이 Denaturation buffer는 더 이상 제공되지 않습니다. 대신, 이 제품의 사용자는 갓 만든 NaOH를 사용해야 합니다. 이 준비에 대한 지침은 ME029 Product Description (2 페이지)에서 찾을 수 있습니다.
- 상기 변경에 따라 ME029는 이제 SALSA Low pH MLPA buffer (보라색 캡)가 함께 공급됩니다. 이 low PH buffer를 Salsa MLPA Reagent kit에 제공되는 일반 MLPA buffer (노란색 캡) 대신 사용해야 합니다.
왼쪽: Denaturation buffer와 함께 제공되는 ME029-B3, 오른쪽: Low pH MLPA buffer와 함께 제공되는 ME029-C1.
제품 변경의 이유:
SALSA MLPA Probemix ME029-C1 FMR1-AFF2에서 표적으로 하는 FMR1 및 AFF2 영역은 특히 긴 삼핵산 반복서열 (trinucleotide repeats, TNRs)의 확장을 포함하는 DNA 샘플에서 변성하기가 매우 어렵습니다. 이러한 이유로 이전 버전의 ME029 probemix에는 추가 Denaturation buffer가 항상 제공되었습니다. 그러나 매우 긴 삼핵산 반복서열은 Denaturation buffer를 사용하는 경우에도 항상 완전히 변성되지 않는 것으로 관찰되었습니다.
이를 개선하기 위해 이제 사용자가 새로 준비한 60mM NaOH 용액을 사용하여 ME029 Denaturation buffer를 대체합니다 (NaOH 용액에 대한 자세한 내용은 첨부된 ME029 product description의 2 페이지에서 확인할 수 있습니다). ME029 MLPA 반응 시작 시 샘플 DNA를 이 60mM NaOH 용액과 혼합해야 합니다.
DNA 샘플에 NaOH를 첨가하면 pH가 증가하여 잠재적으로 ligase 활성이 감소하므로 MRC Holland는 이 효과를 상쇄하기 위해 각 ME029-C1 주문에 낮은 pH 버전의 MLPA buffer (보라색 캡)를 포함합니다. 이 low pH MLPA buffer는 SALSA MLPA Reagent kit에 포함된 일반 MLPA buffer (노란색 캡) 대신 항상 ME029-C1 probemix와 함께 사용해야 합니다.
ME029-C1 product description은 다음 링크에서 확인하실 수 있습니다:
전환 기간:
새 제품 및 프로토콜로 전환하려면 사용자 측에서 약간의 준비가 필요할 수 있습니다. 따라서 2023년 9월 29일 이전에 Denaturation buffer를 포함하는 이전 ME029-B3 버전을 재고가 지속되는 동안 합리적인 수량으로 구매할 수 있습니다. 이전 ME029-B3 버전 주문 관련 문의는 info@mrcholland.com (또는 jwkim@nichebiotech.com)으로 연락주시기 바랍니다. 별도로 지정하지 않는 한 기본적으로 ME029의 새 버전이 제공됩니다.